艾滋唾液檢測試紙操作說明
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人類免疫缺陷病毒抗體口腔粘膜滲出液診斷試劑盒(膠體金法)是基於免疫層析技術通過手工操作、肉眼讀取結果、20分鐘即可定性(陰性/陽性)得出檢測結果的快速診斷試劑,用於檢測口腔粘膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體。口腔樣本中HIV抗體的濃度是血液樣本濃度的1/1000。本品主要由檢測試紙條,樣本緩衝液以及採集樣本的口腔拭子組成。本試驗是利用側向流動免疫反應的原理進行的。
在硝酸纖維素膜的檢測區包被了HIV-1 gp41和HIV-2 gp36重組抗原,在對照區包被了羊抗人IgG F(ab’)2片斷多抗。檢測時,用口腔拭子擦拭受試者的上、下牙齦線,然後將口腔拭子放入盛有約1000 μl樣本緩衝液的試管裏,在試管內混合均勻,將口腔拭子內的液體擠幹後,扔掉拭子。將大約200 μl的樣本混合液轉移到潔淨的試管裏進行檢測。
將檢測試紙條垂直插入裝有樣本混合液的試管裏,試紙上的淡紅色蛋白A-膠體金標記物會溶解,樣本中的IgG(樣本中其他抗體如IgA、IgM的反應原理與IgG相同)同蛋白A/膠體金粒子結合在一起,形成“IgG-蛋白A-金”複合物,“IgG-蛋白A-金”複合物沿着試紙條向上方移動,首先到達包被了HIV抗原的檢測區。如果樣本中含有HIV的抗體,“IgG-蛋白A-金”複合物將同抗原結合,並在檢測線上滯留下來,形成一條淡紅色的線,這表示陽性結果。線條顏色的深淺同樣本中的抗體數量沒有比例關係。
檢測區裏如果沒有帶顏色的線條表示樣本中不含HIV抗體,遊離的“IgG-蛋白A-金”複合物繼續向試紙上方移動,到達試紙的對照區。對照區包被了羊抗人IgG F(ab’)2片斷,固定在試紙條的對照線上。“IgG-蛋白A-金”複合物將同羊抗人IgG F(ab’)2片斷結合在一起而富集在對照線上,形成一條淡紅色的線。對照線的出現證明試紙條檢測功能正常。無論樣本中是否含有HIV-1/2抗體,在有效試驗中,試紙條的對照區都應當出現淡紅至紫色的對照線。樣本繼續移動,通過對照區進入吸收區。吸收區的作用是吸附剩餘的“IgG-蛋白A-金”複合物,使其在試紙條內移動,並消除本底的顏色。
自試紙條插入稀釋後的樣本混合液起計時,20分鐘後方可讀取結果.
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