胰岛素抗体检测方法
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1、胰岛素抗体生化特征与病理生理作用
胰岛素抗体主要是IgG,少数受药者可查到IgM、IgD、IgE胰岛素抗体,IgE抗体主要出现在对胰岛素产生过敏反应的病人。
血清中的胰岛素抗体95~99.9%是与胰岛素相结合,少部分游离状态。胰岛素与抗体结合率视血中胰岛素浓度而异。血中包括高亲和力-低结合容量和低亲和力-高结合容量两种抗体。前者亲和常数为:10 9~10 1 0mol/L,结合容量为:10 8mol/L;后者亲和常数为10 6~10 8mol/L,结合容量为10ˉ7mol/L。低亲和力抗体占总结合容量90%以上,故生理意义较大。胰岛素抗体的生理作用为:中和血中胰岛素;延缓胰岛素降解、延长胰岛素兰衰期;释放出与抗体结合的胰岛素;起到胰岛素转运蛋白的作用;抗原-抗体复合可激活补体,长期作用可引起或加重微血管病变。#p#副标题#e#
2、胰岛素抗体的检测方法和注意事项
(1)主要方法有:免疫电泳法、补体结合法、凝结试验法、免疫沉淀法、凝胶过滤法和放射免疫法。因灵敏度高方法简便而以放射免疫法最为常用。结合容量单位通常以U/L或mol/L表示。
定量测定胰岛素抗体必需预先去除样品中的胰岛素。去除胰岛素的方法是:将血清加入HCL,使抗体与胰岛素解离,然后用活性炭吸附胰岛素。去除胰岛素的方法是:将血清加入HCL,使抗体与胰岛素解离,然后用活性炭吸附胰岛素,或用聚乙二醇沉淀抗体,处理后的榈可作抗体稀释试验。
(2)注意事项
为了避免胰岛素对抗体测定的影响,受血应选择在早晨注射胰岛素之前。#p#副标题#e#
3、胰岛素抗体测定的临床意义
(1)胰岛素抗体与糖尿病稳定性的关系
Dixon观察了24例发病为35岁病情稳定糖尿病人,其胰岛素抗体结合容量为0.5~9.0U/L;23例发病年龄为23岁病情不稳定糖尿病人,其胰岛素抗体结合容量<0.5u/L。这表明中度升高的胰岛素抗体对调节血中游离胰岛素水平有利,对稳定病情有益。病情稳定主要依赖于病人本身残余的胰岛功能,胰岛素抗体可帮助维持血中游离胰岛素于较稳定水平,使其不致于过高过低而起到缓冲作用。这对几乎完全丧失β细胞功能者有较大意义。
(2)胰岛素抗体与Ⅰ型糖尿病的自发性缓解期
1型糖尿病人早期经胰岛素治疗一段时间后,β细胞功能有一定程度恢复,病情缓解,此时可少用或停用胰岛素治疗,称为“自发性缓解期”。胰岛素抗体可影响此缓解期的长短。由于抗体能结合和消耗内源性胰岛素,因此有抗体病人复发率明显高于无抗体组,即:病人血胰岛素抗体水平与自发缓解期长短呈负相关.
(3)胰岛素抗体与低血糖
糖尿病患者夜间自发性低血糖可能与胰岛抗体有关。胰岛素抗体可结合血中大量胰岛素,当夜间血酸度增高、血中游离胰岛素下降较快时,胰岛素与抗体解离,释放而引起低血糖综合症。当使用高纯胰岛素使胰岛素抗体减少或消失,低血糖发作亦可减少或停止。
(4)胰岛素抗体与妊娠糖尿病
糖尿病妇女怀孕后,胰岛素抗体水平下降。这是由于母体雌、孕激素升高而抑制抗体生成。有报告指出,母体胰岛素抗体通过胎盘而沉积于胎儿的胰脏,从而导致遗传性糖尿病。妊娠糖尿病者应用纯胰岛素降低胰岛素抗体水平。
(5)胰岛素抗体与糖尿病晚期合并症
胰岛素抗体可能促发或加重糖尿病微血管病变。业已证实胰岛素抗体IgG沉淀于实验动物的肾小球,类似肾小球结节性硬化。临床证实,胰岛抗体水平高的病人、糖尿病肾病及增殖性视网膜病发生较早。
(6)胰岛素抗体与胰岛素抵抗
糖尿病病人在使用胰岛素过程中,可因血中胰岛素抗体生成较多而使受药者对胰岛素逐渐不敏感,此时血中抗体结合率高,换用纯胰岛素后可使抗体明显下降,同时用药剂量减少,需用超常量胰岛素才能产生正常量反应时称为胰岛素抵抗。出现胰岛素抵抗的患者血清胰岛素抗体结合容量大于9U/L,而非抵抗者5U/L以下,大多数小于0.1U/L。使用高纯胰岛素是解决由胰岛素抗体引起的胰岛素不敏感或胰岛素抵抗唯一有效的办法。
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